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果膠裂解酶

   日期:2019-07-05     瀏覽:430    評(píng)論:0    
核心提示:果膠裂解酶(PL)是果膠酶的一種,它催化果膠分子鏈的消除裂解,在食品加工工業(yè)中,提高果汁產(chǎn)量方面有重要意義。 果膠裂解酶(反式消去酶)是通過(guò)反式消去作用裂解果膠聚合體的一種果膠酶,裂解酶在C一4位置上斷開(kāi)糖苷鍵,同時(shí)從C一5處消去一個(gè)H原子從而產(chǎn)生一個(gè)不飽和產(chǎn)物。
果膠裂解酶
果膠裂解酶(PL)是果膠酶的一種,它催化果膠分子鏈的消除裂解,在食品加工工業(yè)中,提高果汁產(chǎn)量方面有重要意義。
果膠裂解酶(反式消去酶)是通過(guò)反式消去作用裂解果膠聚合體的一種果膠酶,裂解酶在C一4位置上斷開(kāi)糖苷鍵,同時(shí)從C一5處消去一個(gè)H原子從而產(chǎn)生一個(gè)不飽和產(chǎn)物。
中文名:果膠裂解酶
外文名:Pectate lyase
用    途:食品酶制劑
最適溫度:40~50℃
最適pH:7.5~10.0
作用底物:果膠
發(fā)現(xiàn)的歷史
1960年Albersheim 第一歡從商品酶制劑pectinol R-l0中發(fā)現(xiàn)了果膠裂解酶,1962年他從這個(gè)商品酶制劑中提純獲得了果膠裂解酶,并研究了果膠裂解酶的性質(zhì)。以后相繼有人用凝膠過(guò)濾和離子交換層析等技術(shù)從真菌培養(yǎng)物及細(xì)菌培養(yǎng)物中分離得到純的果膠裂解酶。 
分類
根據(jù)其作用機(jī)理以及作用底物的不同,裂解酶可以劃分為:
①內(nèi)切聚半乳糖醛酸裂解酶(EndoPGL,E.c.4.2.2.2);
②外切聚半乳糖醛酸裂解酶(ExoPGL,E.c.4.2.2.9);
⑨內(nèi)切聚甲基半乳糖醛酸裂解酶(EndoPMGL,E.C.4.2.2.10);
④外切聚甲基半乳糖醛酸裂解酶(ExoP-MGL)。
來(lái)源
聚半乳糖醛酸裂解酶(PGLs)可以由多種細(xì)菌和一些致病性的真菌產(chǎn)生,內(nèi)切聚半乳糖醛酸裂解酶比外切聚半乳糖醛酸裂解酶要豐富。可以從腐爛食物中的細(xì)菌和真菌中分離到PGLs。據(jù)報(bào)道,從Colletotrichum lindemutmionum,Bacteroides thetaiotaomicrom 等菌株中可以分離到此種酶。
相比之下關(guān)于聚甲基半乳糖醛酸裂解酶(PMGLs)的產(chǎn)品卻鮮于報(bào)道,僅有少數(shù)報(bào)道指出我們可以從Aspergillusjaponicus,Penicillium paxilli 等菌株中中分離到此種酶。 
酶活力檢測(cè)方法
檢測(cè)裂解酶酶活最便利的方法就是以聚半乳糖醛酸為底物,在波長(zhǎng)235nm處測(cè)定反應(yīng)混合物吸光值的增加值。PGL和PMGL的消光系數(shù)分別是4.6×103和5.5×103M-1cm-1。另外,利用測(cè)黏度減少量的方法和 HPLC測(cè)量中間產(chǎn)物的方法結(jié)合起來(lái)可以區(qū)分出內(nèi)切或外切裂解酶。 
物理化學(xué)和生物學(xué)特性
大多數(shù)裂解酶的分子量在30~40 kDa之間,最適溫度在40~50℃之間,最適pH值在7.5~10.0,等電點(diǎn)在7.0~11.0之間。由Aureobasidium pullulans LV-10 產(chǎn)生的兩種PMGLs,L1和L2,最適溫度為40℃,最適pH值分別是5.0和7.5。據(jù)Singh et al. 報(bào)道,來(lái)自Bacillus sp. 的一種耐熱外切聚半乳糖醛酸酶在pH為11.0,且溫度為69℃時(shí)具有最高的酶活力,此種酶的作用需要Ca+2的參與。據(jù)報(bào)道,PGLs的作用必須有Ca+2參與,因此螯合劑例如EDTA是他們的抑制劑,而PMGLs的作用不必要陽(yáng)離子的參與,但有Ca+2或其他陽(yáng)離子參與能促進(jìn)反應(yīng)進(jìn)行,并且內(nèi)切聚甲基半乳糖醛酸裂解酶是唯一的、不需要其他酶的預(yù)處理就可以裂解高酯化果膠中的α一1,4一糖苷鍵的酶。 
生物果膠酶在工業(yè)生產(chǎn)上的應(yīng)用
果汁的提取
果膠酶在工業(yè)中最主要的用途是用于果汁的提取和澄清。果汁中如果存在果膠物質(zhì),果汁的黏度就加大并且變得混濁。工業(yè)生產(chǎn)就是利用果膠酶和淀粉酶的混合物來(lái)澄清果汁,它能使過(guò)濾的時(shí)間縮短50%。用果膠酶處理香蕉、葡萄和蘋(píng)果等的果肉,它能夠提高果汁的產(chǎn)量。用果膠酶處理果汁時(shí),其用量對(duì)澄清效果有很大影響。果膠酶用量低時(shí),果膠分解不完全,澄清效果差;用量過(guò)高,酶蛋白又會(huì)使果汁產(chǎn)生渾濁。所以果膠酶的用量有一個(gè)最適范圍。據(jù)王鴻飛等報(bào)道,在獼猴桃果汁中的用量為0.09~0.17 mL/L,而在桑椹果汁中的用量為0.15~0.21mL/L,,果汁中的果膠能基本分解,透光率達(dá)到95%以上。在工業(yè)生產(chǎn)中還利用向柑橘類水果中注射果膠酶的方法來(lái)軟化去除橘皮。往貯藏的桃子中注射果膠甲酯酶和鈣,結(jié)果注射后的桃子的硬度是以前的4倍,這項(xiàng)成果可以應(yīng)用于腌漬生產(chǎn)過(guò)程中。用于防止在發(fā)酵和貯藏過(guò)程中腌制品過(guò)于軟化。
果酒的釀造
隨著生活水平的提高,人們對(duì)果酒的消費(fèi)量也日益增加。果膠酶在果酒生產(chǎn)中的作用也得到了越來(lái)越多業(yè)界人士的認(rèn)可。在果酒生產(chǎn)中加入果膠酶能提高果酒產(chǎn)品的色感,具有更好的感官度;可以澄清果酒,使產(chǎn)品更穩(wěn)定;可以增加果酒的香味,使口感更飽滿等。屈慧鴿等研究了果膠酶對(duì)紅葡萄酒主要成分的影響,結(jié)果表明:加入果膠酶可迅速降低汁液的黏度,利于色素的溶出,顏色較深;加入果膠酶的樣品比未加果膠酶的樣品發(fā)酵劇烈、迅速,可降低揮發(fā)酸的生成量;可使原酒干浸出物含量和總酚含量增加,提高葡萄酒質(zhì)量。經(jīng)岳強(qiáng)等研究發(fā)現(xiàn),在發(fā)酵過(guò)程中。添加果膠酶可以促進(jìn)聚合多酚和多品種香氣的生成,增加果酒的香味。李敏杰等利用皂土、PVPP(聚乙烯基聚吡咯烷酮)、果膠酶3種澄清劑對(duì)菠蘿發(fā)酵原酒進(jìn)行初步的澄清實(shí)驗(yàn),并對(duì)處理后菠蘿酒的透光度、酒度、總酸和殘?zhí)沁M(jìn)行測(cè)定,結(jié)果表明,果膠酶是最好的澄清劑,且當(dāng)果膠酶用量為0.012%時(shí),澄清效果最好。楊輝等例將果膠酶應(yīng)用于蘋(píng)果酒生產(chǎn)的榨汁工藝,通過(guò)正交實(shí)驗(yàn)優(yōu)化了果膠酶處理果汁的工藝條件,其最佳工藝條件為:pH 4.2,溫度50℃,果膠酶用量為250mL/L果汁,作用時(shí)間1 h。結(jié)果表明,應(yīng)用果膠酶可提高出汁率20%,澄清度可達(dá)到90%以上。
在其他行業(yè)中的應(yīng)用
近年來(lái),在紡織業(yè)中,人們把果膠酶和淀粉酶、脂肪酶、纖維素酶、半纖維素酶聯(lián)合起來(lái)用于去除棉花上的膠狀物。此種方法取代了以往用有毒且具有腐蝕性的蘇打水的方法,該法更安全,對(duì)生態(tài)環(huán)境更有利。
在飼料生產(chǎn)工業(yè)上,由于植物性原料中含有果膠質(zhì),它是一種抗?fàn)I養(yǎng)因子,影響飼料的利用率。飼料中添加果膠酶能有效的降解果膠質(zhì),能有效促進(jìn)營(yíng)養(yǎng)成分吸收,從而提高飼料的利用率。
造紙工業(yè)上,果膠酶可以將果膠或者聚半乳糖醛酸降解,減少紙張漂白過(guò)程中陽(yáng)離子的使用。在熱磨機(jī)械紙漿過(guò)程中,溶解性的膠體物會(huì)釋放出來(lái)陰離子多糖,使用果膠酶可以消除其危害,還可以提高紙漿的質(zhì)量。
苧麻脫膠工藝上果膠酶的應(yīng)用也較為廣泛,由于麻類植物中含有纖維素、果膠半纖維素等,其中非纖維部分占麻類成分的20-30%,紡織時(shí)須去除。化學(xué)脫膠法操作條件艱苦,且產(chǎn)生大量廢水。利用果膠酶分解麻類的果膠質(zhì),減少了環(huán)境的污染,且人工操作簡(jiǎn)單。
此外,隨著生物技術(shù)的發(fā)展,果膠酶在植物韌皮纖維的脫膠、污水處理、咖啡和茶的發(fā)酵生產(chǎn)、飼料等領(lǐng)域都將得以應(yīng) 用。 

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