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紅曲黃色素

   日期:2019-07-01     瀏覽:1218    評論:0    
核心提示:紅曲黃色素是以紫色紅曲霉(Monascus purpureus)和赤紅曲霉(M.anka)為原料,利用現代的生物技術提取而成的天然著色劑,主要成分為紅曲黃素(ankaflavin)和紅曲素(monascin)等。紅曲黃色素主要用于糖果,果凍,冷飲等的著色,為黃色著色劑。
紅曲黃色素
 
紅曲黃色素是以紫色紅曲霉(Monascus purpureus)和赤紅曲霉(M.anka)為原料,利用現代的生物技術提取而成的天然著色劑,主要成分為紅曲黃素(ankaflavin)和紅曲素(monascin)等。紅曲黃色素主要用于糖果,果凍,冷飲等的著色,為黃色著色劑。
中文名
紅曲黃色素
外文名
monascus yellow
成    分
紅曲黃素、紅曲素
應    用
食品著色劑
簡介
紅曲色素是紅曲霉的一種次級代謝產物,其結構為一種聚酮類化合物。紅曲色素是一種復合色素,目前已被鑒定并且命名的紅曲色素主要有6種,其中呈現紅色的是紅斑玉紅胺(Monascorubramine)和紅斑紅曲胺(Rubropunctamine),橙色的是紅曲玉紅素(Monascorubrine)和紅斑紅曲素(Rubropunctatine), 黃色的是安卡紅曲黃素(Ankaflavine)和紅曲素(Monascine)。紅曲色素是由微生物發酵制得,經毒性實驗證明其安全無毒。目前,紅曲色素已被應用于食品、藥品、化工等眾多行業。紅曲色素中含量最高的是紅色素組分,雖然紅曲黃色素組分在紅曲色素中的含量較低,但黃色素作為一類重要的食用色素品種占有市場需求比的60%,因此開發利用紅曲黃色素具有極廣闊的商業前景。
紅曲黃色素是以紫色紅曲霉(Monascus purpureus)和赤紅曲霉(M.anka)為原料,利用現代的生物技術提取而成的天然著色劑,主要成分為紅曲黃素(ankaflavin)和紅曲素(monascin)等。紅曲黃色素主要用于糖果,果凍,冷飲等的著色,為黃色著色劑。
日本和韓國均已制定了紅曲黃色素的國家標準,但在中國大陸,紅曲黃色素的生產才剛剛起步,主要的生產方法有液態發酵法、固態發酵法和轉化法。由于紅曲黃色素的生產起步較晚,目前生產廠家也很少,產品并未大規模上市。最近有關單位和企業正在制定紅曲黃色素的國家標準,建立一套合理可行的紅曲黃色素檢測方法非常必要。 

理化性質
紅曲黃色素為黃至黃褐色粉末、塊狀、糊狀或液體,略有特征性氣味,溶于水。
穩定性
1、pH
紅曲黃色素在酸性條件下較穩定,黃色比較鮮艷,隨著pH的降低,黃色趨于明亮。在中、堿性條件下顏色發生改變,逐漸變成紅色。
2、溫度
紅曲黃色素溶液在100℃下加熱60min,吸光度殘存率為95%,經60℃、80℃烘箱加熱2 d,吸光度殘存率在 70%以上,在100℃條件下,溶液先是褪色至淡黃,40 h溶液出現褐色沉淀顆粒,色素液遭到了嚴重的破壞。紅曲黃色素的耐熱性較好,這對于食品加工工業來說,是有實際意義的。
3、紫外光
在未添加任何添加劑的對照組中,在光照的最初0.5 h內,色素液的吸光度殘存率下降為76.2%,隨著光照時間的延長,相鄰兩個樣品的吸光度差值越來越小,即吸光度殘存率降低的幅度越來越小。3.5 h后色素液的吸光度殘存率僅為37.7%。紅曲黃色素的光降解的數學模型為三次曲線。
4、抗壞血酸
抗壞血酸的抗氧化活性是由于各種形式氧(單線態氧、羥基和過氧化物)的猝滅,自由基的還原,從而中斷自由基反應。通過實驗發現,在紫外光照條件下,添加0.05%抗壞血酸的色素液的吸光度殘存率在0.5 h為84.3%,3.5 h殘存率為39.3%。添加量為0.2%抗壞血酸的色素液,0.5h吸光度殘存率是87.6%,3.5 h殘存率為69.7%。隨著抗壞血酸添加濃度的增加,黃色素溶液的吸光度殘存率下降越小。
5、茶多酚
茶多酚的主體成分兒茶素能夠提供還原性質子,進而捕獲自由基起到抗氧化作用。其基本結構均為2連或鄰苯酚基苯并吡喃衍生物。正是這種結構具有連或鄰苯酚基,其作為抗氧化的活性就高于一般非酚類或單酚羥基類抗氧化劑。添加0.005%的茶多酚色素液的吸光度殘存率在0.5 h為82.4%,3.5 h殘存率為47.7%。添加0.02%茶多酚的色素液0.5 h吸光度殘存率為84.3%,3.5 h殘存率為69.0%。添加0.03%茶多酚的色素液0.5 h殘存率為85.5%,3.5 h殘存率為81.0%。天然抗氧化劑茶多酚對提高黃色素的光穩定性效果比較顯著,隨著添加濃度的增加,黃色素溶液的吸光度殘存率下降越小,使得黃色素色價的半衰期延長。而且茶多酚的添加量僅為抗壞血酸的十分之一時,色素穩定效果已和抗壞血酸的效果相近。 
分離純化
1、黃色素粗提液的制備
收集搖瓶發酵液菌體,烘干后研磨成粉末。采用70%乙醇溶劑超聲提取紅曲色素,提取液于旋轉蒸發器中50℃、100 MPa條件下真空濃縮去除乙醇溶劑,旋蒸后的濃縮液進行預凍處理,最后置于冷凍干燥機中冷凍干燥成粉末。稱取2 g紅曲色素粉末溶于10 mL正己烷溶劑,于超聲中50℃提取1 h,過濾除去粉末殘余雜質得黃色素混合粗提液。
2、柱層析的預處理
硅膠的預處理:稱取14 g硅膠于110℃活化1 h后放入干燥的燒杯中冷卻,加適量的溶劑溶解并浸泡30 min(浸泡硅膠的溶劑與洗脫黃色組分的溶劑相同)。
硅膠裝柱:清洗干凈玻璃層析柱,干燥后,濕法裝柱,本實驗層析柱規格(ψ20 mm×200 mm)。將層析柱垂直固定在鐵架臺上,將浸泡好的硅膠連同溶劑均勻倒入層析柱內。待柱子上端的懸浮液慢慢下降到需要的高度,鋪一層海砂防止加樣與洗脫時擾動柱表面,最后用洗脫劑平衡2個柱體積。
上樣:平衡柱子后,待平衡液的彎月面正好與硅膠床面持平時,將用洗脫溶劑提取后的紅曲黃色素粗提液加到柱表面,操作時要小心謹慎以免擾動柱表面。
樣品的洗脫:洗脫紅曲黃色素選用正己烷、石油醚、乙酸乙酯三種常用低極性溶劑,按一定體積配比混合后作為洗脫劑,收集黃色組分,經一系列操作后濃縮干燥得紅曲黃色素。
3、HPLC-MS分析
收集柱層析分離純化后得到的黃色洗脫液,經旋蒸后去除有機溶劑得到紅曲黃色素黏狀物,甲醇超聲復溶黃色素組分過濾膜待測。再分別將菌體粉末甲醇超聲復溶,正己烷提取后的黃色素粗提物進行甲醇超聲復溶,保持樣品的處理濃度一致。最后將各個樣品用孔徑為0.45 μm的有機微孔濾膜微濾后直接用于HPLCMS分析。通過液相質譜檢測,得出紅曲黃色素分離純化結果的液相色譜、質譜圖,并對純化的效果進行分析表征。 
陳
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