天門冬酰苯丙氨酸甲酯乙酰磺胺酸（aspartame-acesulfame salt）是以天門冬酰苯丙氨酸甲酯和乙酰磺胺酸鹽為原料,經(jīng)反應(yīng)、離心、干燥等步驟加工制得的食品添加劑。化學(xué)名稱是[2-羧基-β-(N-(b-甲氧羰基-2-苯基)乙基氨甲酰基)]乙胺正離子-6-甲基-4-氧代-1,2,3-噻嗪-3-負(fù)離子化物-2,2-二氧化物，分子式C18H23O9N3S，相對分子質(zhì)量457.46。純品天門冬酰苯丙氨酸甲酯乙酰磺胺酸是白色結(jié)晶性粉末，無味 。

天門冬酰苯丙氨酸甲酯乙酰磺胺酸可作為甜味劑：

用于風(fēng)味發(fā)酵乳；最大使用量0.79g/kg；

用于冷凍飲品(食用冰除外)；最大使用量0.68g/kg；

用于水果罐頭；最大使用量0.35g/kg；

用于果醬；最大使用量0.68g/kg；

用于蜜餞類；最大使用量0.35g/kg；

用于腌漬的蔬菜；最大使用量0.20g/kg；

用于糖果；最大使用量4.5g/kg；

用于膠基糖果；最大使用量5.0g/kg；

用于雜糧罐頭；最大使用量0.35g/kg；

用于餐桌甜味料；最大使用量0.09g/kg；

用于調(diào)味品；最大使用量1.13g/kg；

用于醬油；最大使用量2.0g/kg；

用于飲料類(包裝飲用水除外)；最大使用量0.68g/kg ；

用于天門冬酰苯丙氨酸甲酯和乙酰磺胺酸含量的測定

試劑和材料：苯甲酸:純度≥99%，乙醇，N,N-二甲基甲酰胺；

百里酚藍(lán)甲醇溶液:稱取0.30g百里酚藍(lán)于燒杯中,用甲醇溶解并稀釋至100mL；

四丁基氫氧化銨甲醇溶液:0.1mol/L。

四丁基氫氧化銨甲醇溶液(0.1mol/L)的標(biāo)定:量取10mLN,N-二甲基甲酰胺于錐形瓶中,加入0.05mL百里酚藍(lán)甲醇溶液,用0.1mol/L四丁基氫氧化銨甲醇溶液滴定直至純藍(lán)色產(chǎn)生。立即加入0.2g(精確到0.001g)苯甲酸,攪拌,藍(lán)色消失,在氮?dú)獗Ｗo(hù)下用0.1mol/L四丁基氫氧化銨甲醇溶液滴定直至純藍(lán)色產(chǎn)生。記錄第二次滴定所消耗的滴定液體積(V)。四丁基氫氧化銨甲醇溶液的濃度c1,以摩爾每升(mol/L)計,按式(A.1)計算:

c1=m×1000/V×M1…………………………(A.1)

式中:

m-苯甲酸的質(zhì)量,單位為克(g);

1000———換算系數(shù);V-第二次滴定所消耗的四丁基氫氧化銨甲醇溶液的體積,單位為毫升(mL);

M1-苯甲酸的摩爾質(zhì)量,單位為克每摩爾(g/mol),[M1(C7H6O2)=122.12]。

儀器和設(shè)備：pH計或電位滴定儀。

分析步驟：

稱取約0.1g~0.15g試樣,精確至0.001g。置于200mL燒杯中,用50mL乙醇溶解,在氮?dú)獗Ｗo(hù)下,用0.1mol/L四丁基氫氧化銨甲醇溶液滴定,用pH計或電位滴定儀測定電位值,記錄第一突躍點和第二突躍點的滴定體積(V1,V2),同時量取50mL乙醇進(jìn)行空白滴定,記錄體積(V0)。A.4.1.4結(jié)果計算乙酰磺胺酸的質(zhì)量分?jǐn)?shù)w1,按式(A.2)計算:

w1=V1×c1×M2×100%/m1×1000…………………………(A.2)

式中:

V1-試樣中第一突躍點所消耗四丁基氫氧化銨甲醇溶液的體積,單位為毫升(mL);

c1-四丁基氫氧化銨甲醇溶液的濃度,單位為摩爾每升(mol/L);

M2-乙酰磺胺酸的摩爾質(zhì)量,單位為克每摩爾(g/mol),[M2(C4H5NO4S)=163.15];

m1-試樣的質(zhì)量,單位為克(g);

1000-換算系數(shù)。

天門冬酰苯丙氨酸甲酯的質(zhì)量分?jǐn)?shù)w2,按式(A.3)計算:

w2=(V2-V1-V0)×c1×M3×100%/m1×1000…………………(A.3)

式中:

V2-試樣中第二突躍點所消耗四丁基氫氧化銨甲醇溶液的體積,單位為毫升(mL);

V1-試樣中第一突躍點所消耗四丁基氫氧化銨甲醇溶液的體積,單位為毫升(mL);

V0-空白所消耗四丁基氫氧化銨甲醇溶液的體積,單位為毫升(mL);

c1-四丁基氫氧化銨甲醇溶液的濃度,單位為摩爾每升(mol/L);

M3-天門冬酰苯丙氨酸甲酯的摩爾質(zhì)量,單位為克每摩爾(g/mol),[M3(C14H18N2O5)=294.31];

m1-試樣的質(zhì)量,單位為克(g);

1000-換算系數(shù)。

試劑和材料:乙酰磺胺酸:純度≥99.0%；

天門冬酰苯丙氨酸甲酯:純度≥99.0%；

磷酸鉀溶液:稱取5.6g磷酸鉀,加入820mL水,用磷酸調(diào)節(jié)pH=4.3,加入180mL甲醇,混勻,過0.45μm濾膜,脫氣備用。

甲醇溶液:1+9。

儀器和設(shè)備：高效液相色譜儀:配有紫外檢測器。

分析步驟

標(biāo)準(zhǔn)溶液制備

乙酰磺胺酸標(biāo)準(zhǔn)儲備溶液:1000mg/L,精確稱取0.100g乙酰磺胺酸標(biāo)準(zhǔn)品,用甲醇溶液定容到100mL,混勻備用。

天門冬酰苯丙氨酸甲酯標(biāo)準(zhǔn)儲備溶液:1000mg/L,精確稱取0.100g天門冬酰苯丙氨酸甲酯標(biāo)準(zhǔn)品,用甲醇溶液定容至100mL,混勻備用。

乙酰磺胺酸和天門冬酰苯丙氨酸甲酯混合標(biāo)準(zhǔn)溶液:100.0mg/L,分別吸取乙酰磺胺酸和天門冬酰苯丙氨酸甲酯標(biāo)準(zhǔn)儲備溶液10.0mL至100mL容量瓶,用甲醇溶液定容,混勻備用。

乙酰磺胺酸和天門冬酰苯丙氨酸甲酯混合標(biāo)準(zhǔn)系列溶液:分別移取乙酰磺胺酸和天門冬酰苯丙氨酸甲酯標(biāo)準(zhǔn)混合標(biāo)準(zhǔn)溶液1.0mL、2.5mL、5.0mL、7.5mL、10.0mL至10mL容量瓶,用甲醇溶液定容,混勻,即得10.0mg/L、25.0mg/L、50.0mg/L、75.0mg/L、100.0mg/L混合標(biāo)準(zhǔn)系列溶液。

試樣溶液制備

稱取約0.1g試樣,精確至0.001g。置于100mL燒杯中,用少量甲醇溶液溶解。移入100mL容量瓶中,用甲醇溶液稀釋至刻度,搖勻。精密量取1.0mL上述溶液,用甲醇溶液定容至10mL,供液相色譜儀測定,本試樣溶液需現(xiàn)配現(xiàn)測。

色譜參考條件

色譜柱:C18柱,250mm×4.6mm,5μm,或是同等分離效果的色譜柱。流動相:磷酸鉀溶液。檢測波長:210nm。柱溫:40℃。流速:2.0mL/minA.4.2.3.4測定分別吸取混合標(biāo)準(zhǔn)系列溶液和試樣溶液各10μL進(jìn)行液相色譜測定,根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)工作曲線計算試樣中乙酰磺胺酸和天門冬酰苯丙氨酸甲酯的含量。

結(jié)果計算

試樣中乙酰磺胺酸或天門冬酰苯丙氨酸甲酯的質(zhì)量分?jǐn)?shù)w3,按式(A.4)計算:

w3=c2×V3×f×100%/m2×1000×1000×100%…………………………(A.4)

式中:

c2-從標(biāo)準(zhǔn)工作曲線得到的乙酰磺胺酸或天門冬酰苯丙氨酸甲酯溶液的濃度,單位為毫克每升(mg/L);

V3-試樣溶液的定容體積,單位為毫升(mL);

f-試樣溶液的稀釋倍數(shù);m2-試樣的質(zhì)量,單位為克(g);

1000-換算系數(shù)。